AAT Bioquest 16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒 *綠色熒光*

我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供，正規(guī)進(jìn)口，保證原裝正品，貨期穩(wěn)定，折扣好的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

AAT Bioquest熒光線粒體超氧化物活性試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：16060

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒 *綠色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：200 Tests

AAT Bioquest熒光線粒體超氧化物活性試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests，產(chǎn)品說(shuō)明：

1.    線粒體是細(xì)胞超氧化物的主要生產(chǎn)者。產(chǎn)生低至中等水平的超氧化物對(duì)于正確調(diào)節(jié)許多基本細(xì)胞過(guò)程至關(guān)重要，包括基因表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和肌肉對(duì)耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的適應(yīng)。不受控制的線粒體超氧化物產(chǎn)生會(huì)引發(fā)細(xì)胞氧化損傷，從而導(dǎo)致多種疾病的發(fā)病機(jī)制，包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和衰老。細(xì)胞內(nèi)線粒體超氧化物的檢測(cè)對(duì)于了解適當(dāng)?shù)募?xì)胞氧化還原調(diào)節(jié)及其失調(diào)對(duì)各種病理的影響非常重要。細(xì)胞計(jì)™熒光法細(xì)胞內(nèi)超氧化物檢測(cè)試劑盒使用我們 du te 的超氧化物指示劑 MitoROS™ 520 來(lái)量化活細(xì)胞中的超氧化物水平。MitoROS™ 520是細(xì)胞通透性的，可以快速和選擇性地檢測(cè)線粒體中的超氧化物。與超氧化物反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生綠色熒光。細(xì)胞計(jì)™熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒提供了一種靈敏的一步熒光測(cè)定，可在孵育一小時(shí)后檢測(cè)活細(xì)胞中的線粒體超氧化物。該試劑盒可用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡應(yīng)用。

平臺(tái)

流式細(xì)胞儀

Excitation：488 nm 激光

Emission：530/30 nm 濾光片

儀器規(guī)格：FITC頻道

熒光顯微鏡

Excitation：FITC過(guò)濾器套件

Emission：FITC過(guò)濾器套件

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：FITC過(guò)濾器套件

組件

組件 A：MitoROS™ 520—1瓶

組分B：檢測(cè)緩沖液—1 瓶 （20 mL）

組件C：DMSO—1 瓶 （100 μL）

1.    在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞

2.    用測(cè)試化合物處理細(xì)胞以誘導(dǎo)超氧化物

3.    添加 MitoROS™ 520 工作溶液

4.    將細(xì)胞在 37°C 下孵育 1 小時(shí)

5.    使用FITC熒光組監(jiān)測(cè)熒光

實(shí)驗(yàn)方案摘要（流式細(xì)胞術(shù)）

1.    在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞

2.    用測(cè)試化合物處理細(xì)胞以誘導(dǎo)超氧化物

3.    加入 MitoROS™ 520 儲(chǔ)備溶液，并將細(xì)胞在 37°C 下孵育 1 小時(shí)

4.    使用530/30 nm濾光片（FITC通道）的流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度

重要注意事項(xiàng)：使用前在室溫下解凍所有組件。

儲(chǔ)備液的制備

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. MitoROS 520儲(chǔ)備溶液（500X）：

將50μLDMSO（組分C）加入MitoROS™™ 520（組分A）的小瓶中并充分混合。注意：25 μL 重構(gòu)的 MitoROS™ 520 儲(chǔ)備溶液足以用于 1 個(gè)板。注意：未使用的部分可以等分并在<-20°C下儲(chǔ)存超過(guò)一個(gè)月，如果管子密封嚴(yán)密并保持避光。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

工作溶液的制備

僅適用于熒光顯微鏡

將 5 μL 500X DMSO 重構(gòu)的 MitoROS™ 520 儲(chǔ)備溶液加入 2 mL 檢測(cè)緩沖液（組分 B）中并充分混合。注意：這種工作溶液不穩(wěn)定，需要在使用前新鮮制備。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

對(duì)于熒光顯微鏡/96孔微孔板：

1.    在培養(yǎng)基或所需的緩沖液（如 PBS 或 HHBS）中用 10 μL 10X 測(cè)試化合物（96 孔板）或 5 μL 5X 測(cè)試化合物（384 孔板）處理細(xì)胞。對(duì)于對(duì)照孔（未處理的細(xì)胞），加入相應(yīng)量的復(fù)合緩沖液。

2.    為了誘導(dǎo)超氧化物，將細(xì)胞在37°C下孵育所需的時(shí)間，避光。注意：我們用 264 μM 抗霉素 A （AMA） 在 7°C 下處理 RAW 5.37 巨噬細(xì)胞 2 小時(shí)以誘導(dǎo)超氧化物。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見圖 1。

3.    將 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 MitoROS™ 520 工作溶液添加到細(xì)胞板中。

4.    將細(xì)胞在37°C孵育1小時(shí)，并使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡拍攝圖像。

對(duì)于流式細(xì)胞儀：

1.    根據(jù)需要處理細(xì)胞。

2.    為了誘導(dǎo)超氧化物，將細(xì)胞在37°C下孵育所需的時(shí)間，避光。注意：我們用50μM 抗mei素 A （AMA）在37°C下處理Jurkat細(xì)胞2小時(shí)以誘導(dǎo)超氧化物。

3.    將 1 μL/0.5 mL 的 MitoROS™ 520 儲(chǔ)備溶液 （500X） 細(xì)胞加入細(xì)胞中。

4.    將細(xì)胞在 5% CO 中孵育₂，37°C培養(yǎng)箱1小時(shí)，并使用帶有530/30nm濾光片（FITC通道）的流式細(xì)胞術(shù)監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests